Kidney Int ：肾小管生物钟调节功能障碍导致糖尿病患者肾糖异生增强和过重高血糖

着重及目的：在心血管疾病患者里面，十二指肠通过增大原尿里面的重吸收和上调外侧腹腔里面的糖酵解来促成心血管疾病高高血压的发生。然而，高血压高度的慢性下降可能反过来导致心血管疾病肾病(DN)，这是心血管疾病最严重的肺炎之一，其特征是肾腹腔、肾腹腔和十二指肠血管受损。虽然激素应激是心血管疾病肾病发生和其发展的主要因素，但在大多数心血管疾病患者里面，高高血压本身并不会导致肾机制不全。这得出结论，合并症或周边环境、遗传基因或微小遗传基因的变化可能是启动和/或加速成果DN所必需的。昼夜周期性是一种普遍存在的分子计时机制，它将细胞、许多组织和系统的生物机制与24星期的周边环境天数联动。暂时性昼夜周期性马达细胞各种类型和许多组织特有的周期性，它们的失调与一系列疾病的病症和/或成果有关。然而，心血管疾病患者十二指肠里面内在昼夜周期性的许多组织学认知作用仍不明了。

归纳方法律条文：为了化解这个问题，我们用链苯基隆抗病毒作用于了在手细胞(cKOp活体)或肾腹腔(cKOt活体)里面依赖昼夜周期性RNA抑制因子BMAL1的活体患I型心血管疾病。

活体模型制备：8周龄Bmal1lox/lox/Nphs2-RTTA/LC1活体(cKOp活体)或8周龄Bmal1lox/lox/Pax8-RTTA/LC1活体(cKOt活体)经DOX(饮水里面2 mg/ml)化解问题2时才，Bmal1(ARNTL)基因序列失活。他们的IgG(Bmal1lox/lox活体)接受不同的DOX用药。在DOX用药结束一时才，通过肺部切除链苯基隆抗病毒(STZ，50 mg/kg体重，每日5天)作用于I型心血管疾病。溶媒化解问题的活体接受PBS的溶媒切除。所有测试均在最后一次切除STZ或溶媒8时才进行。在所有测试里面，从ZT9斩首的活体身上收集许多组织和肠道(ZT-Zeitgeber等待时间的单位；ZT0是开灯等待时间，ZT12是关灯等待时间)。

激素笼：活体被驯养在个体激素笼子里面(Tecniplast，意大利)。在4天的适应期后进行24星期的尿液收集。

血红蛋白和尿液生化测量：用Vaudois里面心医院临床测试室(LCC)测量尿和血红蛋白Na+、K+、Ca2+、Mg2+、钼、肌酐、、尿醇和尿素溶解度及循环系统。用醇碱容(Metrohm)测量尿液pH最大值。运用于EPOC肠道归纳容(日立医疗卫生)校准动-静脉混合血的肠道pH最大值和血气。尿铵测量引入Berthelot法律条文。尿可滴定醇测量引入Chan25归纳方法律条文。引入放射免疫法律条文(DPC)测量血红蛋白谷氨酸高度。用Mercodia公司的试剂盒测量血红蛋白胰岛素。

耐量实验(GTT)：禁食15星期后，给空白IgG和cKOt活体肺部切除(1g/kg体重)。分别于切除年前(t=0)、切除后15、30、60、90、120、180min，用高血压读数容测量高血压。

胰岛素耐量实验(ITT)：禁食4h后，给IgG和cKOt活体肺部切除0.5U/kg体重的重整人胰岛素(人重整胰岛素，Sigma)。分别于胰岛素切除年前(t=0)、胰岛素切除后15、30、45、60、90、120、150、180min测量高血压。如果高血压下调2 mm下述，则通过肺部切除30毫克拯救活体，并将其忽略在归纳之外。

RNA测序技术：RNA-SEQ按照Ansermet等人在6.Mus Musculus里面的描述进行。运用于GRCm38.92基因序列注释。运用于TMM归一化对基因序列计数进行定标，并运用于LIMMA R包27里面的“CPM”给定将其对数变换为每百万计数(CPM)。计算出来了KO和Ctrl动物在若有(PBS)和化解问题(STZ)条件下的差异理解以及彼此间的交互作用。对于这三种相对里面的每一种，选择FDR

结果：在中风心血管疾病的cKOp和cKOt活体里面，昼夜周期性机制障碍与心血管疾病肾病的发生很难不确定性。然而，与链苯基隆抗病毒用药的IgG相比，中风心血管疾病的cKOt活体表现出加高高血压过多，尿里面排泄增大，多尿增大，十二指肠肥大更微小。mRNA和细胞内理解归纳显示，与心血管疾病IgG活体相比，cKOt心血管疾病活体十二指肠里面的糖酵解途径很大增强。CKOt心血管疾病活体的RNA归纳和机制归纳确定了直接或间接严重影响糖酵解途径的多种机制的变化。

结论：我们证明了内在肾腹腔昼夜周期性机制障碍可通过增强肾外侧腹腔的糖酵解而过多心血管疾病高高血压，有利于忽略了昼夜周期性抑制在心血管疾病患者里面的重要性。

书名出处：

Ansermet C， Centeno G， Bignon Y，et al.Dysfunction of the circadian clock in the kidney tubule leads to enhanced kidney gluconeogenesis and exacerbated hyperglycemia in diabetes.Kidney Int 2021 Nov 24